紫外可見分光光度計(jì)是分析測(cè)試實(shí)驗(yàn)室里常見的一種分析儀器,用于測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在一定波長(zhǎng)照射下所產(chǎn)生的吸光度的大小,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。其基本結(jié)構(gòu)是由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五個(gè)部分組成。
維護(hù)步驟:
檢查外觀:定期檢查儀器外觀是否正常,有無破損或污漬。
清潔儀器:定期清潔儀器外殼和樣品池,避免灰塵和污漬影響測(cè)量結(jié)果。
更換氘燈:當(dāng)氘燈亮度不足時(shí),應(yīng)及時(shí)更換新的氘燈。更換時(shí)應(yīng)先關(guān)閉電源,取下波長(zhǎng)調(diào)節(jié)鈕,掀開儀器蓋板,待燈冷卻后,用螺絲刀將接線架上三根氘燈引線松開(記下三根引線的顏色),松開氘燈固定螺釘,取出氘燈座,松開夾緊螺釘,換上新氘燈,調(diào)整位置,重新擰緊螺釘,將氘燈接線按原來引線的顏色接好。
校準(zhǔn)波長(zhǎng):定期校準(zhǔn)儀器的波長(zhǎng),以確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
檢查光路系統(tǒng):定期檢查光路系統(tǒng)是否正常,有無松動(dòng)或損壞的部件。
檢查電源線:定期檢查電源線是否老化或破損,以避免安全隱患。
保持環(huán)境干燥:保持儀器使用環(huán)境干燥,避免潮濕影響儀器性能。
定期維護(hù):定期請(qǐng)專業(yè)人員對(duì)儀器進(jìn)行全面檢查和維護(hù),以確保儀器的性能和準(zhǔn)確性。
光源是提供符合要求的入射光的裝置,紫外可見分光光度計(jì)可見光區(qū)常用的光源為鎢燈,紫外光區(qū)常用的光源為氫燈或氘燈。
1. 鎢燈
鎢燈是常用的可見光光源,它可發(fā)射的波長(zhǎng)為325~2500nm的連續(xù)光譜,其中最適宜的使用波長(zhǎng)范圍為320~1000nm,因此,也可用做近紅外光源。電能將鎢燈加熱到白熾時(shí),發(fā)出的光強(qiáng)度在各波段的分布隨燈絲溫度而變化。燈絲的溫度取決于電源電壓。電源電壓的微小波動(dòng)都會(huì)引起鎢光強(qiáng)度的很大變化。因此必須使用穩(wěn)壓電源供電,鎢燈工作電壓為12V,也可以使用12V的直流電源供電。鎢燈的壽命一般可達(dá)10000小時(shí)以上。
目前很多光度計(jì)采用鹵鎢燈代替鎢燈,如7230型、754型分光光度計(jì)等。鹵鎢燈具有較高的發(fā)光效率和較長(zhǎng)的使用壽命。
2. 氘燈
氘燈是常用的紫外光光源。它發(fā)出的光的波長(zhǎng)范圍為190~400nm,使用波長(zhǎng)范圍一般為190~360nm,為保證發(fā)光強(qiáng)度的穩(wěn)定,也要使用穩(wěn)壓電源供電。氘燈的使用壽命:國(guó)產(chǎn)的一般為500~800小時(shí),進(jìn)口的一般為1000小時(shí),少數(shù)的能達(dá)到2000小時(shí)。
近年來,具有高強(qiáng)度和高單色性的激光已被開發(fā)用做紫外光源。已商品化的激光光源有氬離子激光器和可調(diào)諧染料激光器。
單色器
單色器是將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光,并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長(zhǎng)的光的光學(xué)裝置,它是光度計(jì)的心臟。單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成。其中色散元件是單色器的主要部件。常用的色散元件是棱鏡、光柵,或者是兩者的組合。
1. 棱鏡單色器
棱鏡單色器是利用不同波長(zhǎng)的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光,這種現(xiàn)象稱為棱鏡的色散作用。常用的棱鏡由玻璃或石英制成??梢姽夥秶2捎貌AЮ忡R,其色散力強(qiáng),價(jià)格低廉,但是玻璃吸收紫外光,所以不宜用于紫外光區(qū)。紫外光范圍常用石英作為材料,石英棱鏡的工作波長(zhǎng)范圍為185~4000nm,在紫外光區(qū)有較好的分辨力,而且也適用于可見光區(qū)和近紅外光區(qū)。棱鏡單色器的特點(diǎn)是波長(zhǎng)越短,色散程度越好。越趨向長(zhǎng)波,色散程度越差,所以,單色器用棱鏡的分光光度計(jì),其波長(zhǎng)刻度在紫外光區(qū)可達(dá)到0.2nm,而在長(zhǎng)波段,只能達(dá)到5nm。
2. 光柵單色器
光柵實(shí)現(xiàn)上就是一系列等寬、等距離的平行狹縫,它是利用光的衍射與干涉作用制成的。光柵作為色散元件具有不少優(yōu)點(diǎn),光柵單色器的分辨率比棱鏡單色器的分辨率高,可精確到0.2nm,而且可用的波長(zhǎng)范圍也比棱鏡單色器的范圍寬。所以,目前生產(chǎn)的紫外可見分光光度計(jì)大多采用光柵作為色散元件。
吸收池
吸收池是用于盛裝待測(cè)液并決定待測(cè)溶液透光液層厚度的器皿,又稱比色皿。吸收池一般為長(zhǎng)方體,也有圓形或其它形狀的。其底及兩側(cè)為毛玻璃,另兩面為光學(xué)透光面。根據(jù)光學(xué)透光面的材質(zhì),吸收池又可分為玻璃吸收池和石英吸收池兩種。玻璃吸收池用于可見光區(qū)測(cè)定,石英吸收池用于紫外光區(qū)的測(cè)定。吸收池的規(guī)格以光程為標(biāo)志。常用的吸收池規(guī)格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。
檢測(cè)器
檢測(cè)器是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置。測(cè)量吸光度時(shí),并非直接測(cè)量透過吸收池的光強(qiáng)度,而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測(cè)量,這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測(cè)器,又叫接受器。常用的檢測(cè)器有光電池、光電管、光電倍增管及光電二極管陣列檢測(cè)器等。光電池價(jià)格便宜,但長(zhǎng)時(shí)間曝光,會(huì)使靈敏度降低。光電管的靈敏度比光電池高;光電倍增管不僅靈敏度比普通光電管高,而且響應(yīng)速度快,目前中、高檔分光光度計(jì)中一般采用它作為檢測(cè)器。光電二極管陣列檢測(cè)器是紫外可見分光光度計(jì)檢測(cè)的一個(gè)重要進(jìn)展,代表了新的發(fā)展水平。
信號(hào)顯示系統(tǒng)
信號(hào)顯示器是將檢測(cè)器輸出的信號(hào)放大,并顯示出來的裝置。舊型號(hào)的分光光度計(jì)多采用檢流計(jì)、微安表作顯示裝置,直接讀出吸光度或透光率。新型分光光度計(jì)則多采用數(shù)字電壓表等顯示,并用記錄儀直接繪制出吸收(或透射)曲線,并配有計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理器等。